Применение простых быстрых тестов для выявления антител к вирусу иммунодефицита человека типа 1 и типа 2 в пулированных пробах сыворотки крови

Soroka SD, Grenade TC, Phillips S, and Parekh B
Journal of Clinical Virology 27 (2003) pp.90-96
Оцениваемые продукты
Determine ВИЧ-1/2 (Abbott Laboratories)
Sero Strip ВИЧ-1/2 (Saliva Diagnostic Systems, Inc.)
Исследование выполнено в подразделении иммунологии и диагностики ВИЧ, отделение СПИДа Исследовательской лаборатории туберкулёза и заболеваний, передающихся половым путём, Национального центра по инфекционным заболеваниям, США.
Целью исследования было определение возможности двух простых быстрых тестов на ВИЧ (а) обнаруживать антитела на ВИЧ в пулированных пробах крови различного объёма; (б) выявлять недавнее инфицирование ВИЧ в пробах, содержащих образцы с сероконверсией; и (в) распознавать пробы, содержащие антитела к ВИЧ, так же, как это позволяют сделать стандартные серологические методы на проспективно собранных данных.
Аннотация
Вводная информация: использование пулированных проб было предложено в целях расширения контингента тестируемых на антитела к вирусу иммунодефицита человека в популяционных исследованиях и массовых анализах крови, сокращения затрат на лабораторные процедуры. Цели: разработать стратегический метод пулирования проб с использованием простых быстрых тестов на антитела к ВИЧ для выявления ВИЧ-положительных проб и оценки характеристик данного подхода по сравнению с коммерческими тестами, основанными на иммуноферментном анализе (ИФА) и вестерн-блоттинге (WB). План исследования: два иммунохроматографических быстрых теста для горизонтального проточного анализа, Sero Strip ВИЧ-1/2 и Determine ВИЧ-1/2, оценивались на способность выявлять антитела к ВИЧ-1 в образцах сыворотки и/или плазмы крови, объединённых в объёме от 2 до 20, согласно соответствующим протоколам производителей. Тысяча проспективно собранных образцов и 55 образцов, в которых имелась сероконверсия к ВИЧ, были объединены по 5 и подготовлены для анализа двумя простыми быстрыми тестами на ВИЧ. Результаты: оптимальное выявление и избирательность по отношению к образцам, содержащим или не содержащим антитела к ВИЧ-1, для обоих тестов наблюдались в пулированных смесях объёмом от 5 до 10 образцов. Способность двух быстрых тестов выявлять пробы, содержащие среди компонентов смеси антитела к ВИЧ-1 из коммерческих образцов с вызванной ВИЧ-1 сероконверсией, была равноценна возможностям коммерческих систем ИФА и вестерн-блоттинга выявлять антитела к ВИЧ-1 в несмешанных образцах. Применение метода пулирования к проспективно собранным пробам дало отличное соответствие с результатами ИФА/вестерн-блоттинга как по чувствительности (98,88% для Sero Strip ВИЧ-1/2, 100% для Determine ВИЧ-1/2), так и по специфичности (99,56% для Sero Strip ВИЧ-1/2, 99,45% для Determine ВИЧ-1/2). Вывод: Применение стратегии пулирования для каждого из испытанных методов уменьшило число требуемых тестов почти на 50% и позволило значительно сократить расходы на скрининг ВИЧ в условиях, где распространённость ВИЧ не превышает 10%.
 
Результаты
Анализ проспективно собранных образцов тестами Sero Strip ВИЧ-1/2 и Determine ВИЧ-1/2
Быстрый тест
Объёмы проб
Пулированные пробы, содержащие антитела к ВИЧ-1
Отдельные пробы, содержащие антитела к ВИЧ-1
Отдельные пробы, не содержащие антител к ВИЧ-1
Ложно-положительный результат
Ложно-отрицательный результат
Чувствительность (%)а
Специфичность (%)а
Sero Strip
200
61
93
907
4
1
98.88
99.56
Determine
200
61
95
905
5
0
100
99.45
ИФА/вестерн-блоттинг
200
60
90
910
0
0
100
100
а По сравнению с контрольным тестом ИФА/вестерн-блоттингом на антитела к ВИЧ-1
Обсуждение
Разбавление образцов крови не стало значительным препятствием для выявления антител к ВИЧ в смеси из пяти образцов: ни для Strip ВИЧ-1/2, ни для Determine ВИЧ-1/2. Использование этих тестов на пулированных пробах может быть применено для скрининга ВИЧ в странах с ограниченным финансированием здравоохранения, приводя к значительному снижению затрат.